「渣胞」——指在试验中表现出不忠诚、不担任行为的细胞,常常给单纯的试验室打工人带去损伤。
没想到母胎 solo 的我竟然被小小一个细胞渣了,仍是重复被渣。「渣胞」有显着的胞传胞行为,咱们快自查下,看看自家的细胞是不是「渣胞」!文末有胎牛血清试用活动(点此请求),参加就有时机赢取华为手表、Redmi 投影仪、午休椅、猫王蓝牙音箱等精夸姣礼。
具体表现为:细胞间穿插污染,导致试验成果反常,严重者导致已宣布文章被撤稿!
2017 年宣布在 PLoS One 的一篇文章中发现32,755篇文章报告了研讨中细胞辨认过错;
2010 年《世界癌症杂志》(IJC)计算出一列表,在 346 篇文章中,有103篇存在细胞被 Hela 细胞污染的状况;
2017 年武汉大学病毒学国家要点试验室对国内 28 个研讨组织的 278 株常见人源肿瘤细胞系进行 STR 判定后发现,22 个研讨组织的 128 株细胞存在穿插污染/过错判定的状况,过错率高达 46%。
具体表现为:好吃好喝供着,说争吵就争吵。昨日刚传的代,今日就能立刻死给我看;正常 1~2 天就可以长满的细胞,4~5 天才干牵强长起来;本来梭形的细胞养着养着就变成圆形了。
具体表现为:供给虚伪信息,冻的细胞 A,标签写的细胞 B;地摊买的残次 marker 笔悄悄掉色,从液氮罐里捞出来早已看不清是什么细胞,以为是 HK2 细胞,实践是 HT22 细胞,真是大意失荆州。
你在试验过程中是否也遇到过这一些状况?下流试验效果差,数据底子没办法复现!用错细胞,成果真的很严重!
下面是三大细胞避渣办法,期望咱们咱们避开细胞培育圈套,找到真实值得「托付」的细胞,一起顺畅发文,顺畅结业:
STR 判定经过查验测验细胞中的短串联重复位点(Short Tandem Repeat,简称 STR),一般由 2 到 7 个碱基对组成,不同细胞系在该位点的重复次数不同,以此确认细胞系的来历和纯度。
世界细胞系认证委员会(ICLAC)关于细胞判定的攻略(Guide to Human Cell Line Authentication)中要点介绍了这种遍及的运用和承受的办法,而且被 ATCC 等组织强烈推荐。
美国的 ATCC 细胞库、德国的 DSMZ 细胞库以及日本的 JCRB 细胞库等为 STR 分型供给了各细胞株的数据库供比照运用。
ICLAC 定时整理了已知因穿插污染或其他机制而被过错辨认的细胞系登记册()。
依据 ICLAC、ATCC、IJC 等组织的攻略,以下状况主张进行细胞 STR 判定
● 佩带个人防护设备,如一次性灭菌手套、口罩、试验服和护目镜等,操作前仔细手消毒。
● 操作时避免说话或打喷嚏,避免液体飞溅、溢出。避免将未高压灭菌的液体带进操作台并开盖运用,避免气溶胶污染。
● 细胞复苏几天后,对新细胞培育物进行支原体检测,一切进入试验室的细胞培育物都需经过支原体检测。
血清是细胞培育基的重要成分,对保持细胞正常成长和功用有及其重要的效果。细胞培育过程中,血清浓度和血清质量都需求严厉把控。
●彻底培育基中的血清浓度一般为 5%~20%。血清浓度过低,会导致细胞成长速度缓慢,处于「饥饿」状况的细胞形状或许也会产生改动;血清浓度过高,会导致细胞过度增殖及分解,或许会影响细胞特定功用。
●保证血清质量,需运用不含支原体、细菌、真菌、BVDV、BPV 等优质血清,保证经过灭菌处理,契合质控规范,保证细胞的成长状况杰出和养分成分足够。
●尽量选用批次间差异小的血清,保证血清质量的稳定性,还能削减试验成果的不行重复性。
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